细菌性阴道病:4 种检验方法手把手学会

2016-08-23 16:57 来源:丁香园 作者:xxll2006
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在因外因瘙痒及白带恶臭就诊的女性患者中,细菌性阴道病(Bacterial Vaginosis,BV)是主要病因,但大部分细菌性阴道病患者并无明显的临床症状。那么,什么是细菌性阴道病?为何会患病?检验科怎样检测出来?今天就来一起聊聊细菌性阴道病这个话题。

什么是细菌性阴道病?

健康女性的阴道中有相对稳定的菌群,并以一定的比例分布,保持一种动态平衡,其中乳酸杆菌是阴道微生态系统中的优势菌群,对于维持阴道微生态平衡具有非常重要的作用。

乳酸杆菌可以分解糖原产生乳酸,使阴道保持酸性环境,防止有害细菌生长,其还可以产生溶菌酶、细菌素、过氧化氢等物质,可以抑制或杀灭致病菌。而当乳酸杆菌被大量厌氧菌替代,阴道的微生态平衡遭到破坏时,就会发生细菌性阴道病,常见的厌氧菌包括普雷沃菌属(Prevotella sp.)、动弯杆菌属(Mobiluncus sp.),阴道加德纳菌(G. vaginalis)等。

为什么会患细菌性阴道病?

引起 BV 患者阴道菌群转换的具体原因还不完全清楚,BV 是否是由某种性传播的致病菌引起的也不是很确定,但没有性行为的女性很少受 BV 影响。已经证实下面这些因素与 BV 有关:多个性伴、新性伴侣、利用洗液进行阴道冲洗、缺少阴道乳酸杆菌。

BV 患者患下列疾病的风险增加:性传播疾病(如 HIV、淋病、沙眼衣原体感染,HSV-2 感染)、妇科手术并发症、妊娠并发症以及 BV 的复发。BV 还能增加将 HIV 传播给男性性伴的风险。

BV 的检测与诊断

BV 的检测方法很多,常见的有以下几种:

1. 革兰氏染色法

一般采用 Nugent 评分法进行诊断,首先对白带涂片进行革兰氏染色,然后根据图片中不同细菌数量的多少进行评分。细菌分三类,其中 A 类为革兰氏阳性粗大杆菌,为乳酸杆菌;B 类为革兰氏阴性小杆菌和革兰氏阴性球菌,对应阴道加德纳菌和普雷沃菌;C 类为革兰氏染色不定的弯曲小杆菌,对应动弯杆菌。

Nugent 评分是 A+B+C 三项分数的综合,总分 10 分。>6 分可以诊断与 BV,4-6 分属于中间态,<4 分正常,具体评分标准见下表:

每个油镜视野

分值

菌数

定量

A

B

C

>30

4+

0

4

4

6-30

3+

1

3

3

1-5

2+

2

2

2

<1

1+

3

1

1

0

0

4

0

0


2. Amsel’s 四项法

Amsel’s 四项法顾名思义有四项内容:

a. 阴道分泌物呈白色、稀薄如奶状

b. 分泌物中出现线索细胞

c. 阴道分泌物 pH>4.5

d. 阴道分泌物中加入 10% KOH 时会出现鱼腥味

以上四项中出现三项即可诊断为细菌性阴道病。

3. 常规镜检法

通常采用湿片法,在载玻片上加一滴生理盐水,用阴道拭子将阴道分泌物与生理盐水混合,加盖玻片后,在高倍镜下镜检,发现线索细胞且线索细胞占 20% 以上有意义。

4.   多联检测法

a. 过氧化氢(H2O2)检测:我们前面说过,乳酸杆菌可以产生过氧化氢,过氧化氢阴性则说明乳酸杆菌缺乏,阴道微生态平衡遭到破坏;过氧化氢阳性,则说明阴道微生态正常或恢复。检测原理主要是过氧化氢在辣根过氧化物酶的催化下可以使四甲基联苯胺脱氢变蓝,蓝色的深浅与过氧化氢浓度呈正比;

b. 唾液酸苷酶(SNA):当阴道中致病细菌增加时,可以分泌大量唾液酸苷酶,唾液酸苷酶可以提高致病菌吸附,侵入和破坏细胞膜组织,提高致病菌的致病性。唾液酸苷酶阳性说明阴道微生态平衡遭到破坏;唾液酸苷酶阴性,说明阴道微生态正常或恢复。检测原理是:唾液酸苷酶能使无色的 5-溴-4-氯-3 吲哚-唾液酸中的唾液酸分解,游离出的 5-溴-4-氯-3 吲哚变蓝,蓝色的深浅与唾液酸苷酶浓度呈正比;

c. 白细胞酯酶(LET):白细胞酯酶属于非特异指标,当阴道炎症时会有大量白细胞,白细胞破坏后会释放出大量白细胞酯酶。白细胞酯酶阳性证明粘膜受损,有阴道感染,白细胞酯酶阴性则证明粘膜修复,炎症消失。检测原理是:白细胞酯酶能使无色的 5-溴-4-氯-3 吲哚-乙酸中的乙酸基解离,游离出的 5-溴-4-氯-3 吲哚变蓝,蓝色的深浅与白细胞酯酶浓度呈正比;

d. 多胺(PA):感染 BV 时,阴道加德纳菌、普雷沃菌、动弯杆菌等致病菌侵蚀阴道上皮细胞过程中会产生大量多胺代谢产物(丁二胺、戊二胺、三甲胺等)。多胺阳性证明有大量致病菌生长,阴性则正常。阴道加德纳菌检测原理是:多胺在亚硝基铁氰化钠的催化下与苯酚、次氯酸钠发生反应,产生蓝色的靛酚蓝,蓝色的深浅与多胺的多少呈正比;

e. pH 值检测:前面提到 BV 时阴道分泌物的 pH 值会大于 4.5,检测原理是利用指示剂在不同酸碱值时会呈现不同颜色变化;

多联检测法就是联合上面几种检测方法的三种、四种甚至五种来对 BV 进行诊断,这种联合方法因为简单,对操作者技术要求不高,目前在国内被大量采用。但由于该方法都是基于化学反应来判断,而阴道微生态系统是一个很复杂的动态平衡,细菌种类很多,代谢各异,因此不能仅凭化学反应结果就进行诊断,一定要结合临床症状及涂片的形态学来综合判断。

BV 的治疗

1. 推荐疗法

甲硝唑 500 mg 口服,每日 2 次,共用 7 日;或 0.75% 甲硝唑凝胶阴道内用药,每日 1 次,共用 5 日;或 2% 克林霉素软膏睡觉时间涂布阴道,共用 7 日。

2. 替代疗法

替硝唑 2 g 口服,每日 1 次,共用 2 日;或替硝唑 1 g 口服,每日 1 次,共用 5 日;或克林霉素 300 mg 口服,每日 2 次,共用 7 日;或克林霉素阴道栓 100 mg,睡觉时间置于阴道内,每日 1 次,共用 3 日;治疗期间避免饮酒,尽量避免性生活。 

参考文献:http://www.cdc.gov/std/tg2015/bv.htm

本文作者:xxll2006,丁香园论坛检验版版主

编辑: 张开平

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